多反应监测(multiple reaction monitoring, MRM)技术是一种基于已知或假定的反应离子信息,有针对性地选择数据进行质谱信号采集,对符合规则的离子进行信号记录,去除不符合规则离子信号的干扰,通过对数据的统计分析从而获取质谱定量信息的质谱技术。MRM技术是在单反应监测(single reaction monitoring, SRM)技术的基础上演化而来的。PRM(平行反应监视,parallel reaction monitoring)是一种基于高分辨、高精度质谱的靶向蛋白质组学技术,能够对目标蛋白质、目标肽段(如发生翻译后修饰的肽段)进行选择性检测,从而实现对目标蛋白质/肽段进行绝对定量。
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相比于传统的SRM/MRM技术,PRM技术将采集二级信息所用的四级杆质量分析器替换为更高分辨、更高质量精度的分析器,实现了从目标离子对检测到全部目 标离子碎片检测的转化。因此,PRM技术不仅具有SRM/MRM的靶向定量分析能力,还同时具备了定性能力。
同位素标记 | 非同位素标记 |
样本标记同位素 | 样本非标记 |
样本量限制,ICAT(2),iTRAQ(8) | 样本无限制 |
在大样本过程中,难于跟踪蛋白丰度 | 易跟踪蛋白风度 |
多数肽段难于识别 | 能够识别大多数肽段 |
难于识别和定量低丰度 | 能够鉴别低丰度肽段 |
需提前进行二级质谱蛋白鉴定 | 可以鉴定差异后再进行二级质谱蛋白鉴定 |
实验重现性高 | 实验重现性低 |
高通量测序数据日益加大,呈指数型积累上升,必须交由高速网络提速分析。
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